技術文章
TECHNICAL ARTICLES一、顯微鏡的操作使用
利用自然光源鏡檢時,用朝北的光源,不宜采用直射陽光;利用人工光源時,宜用日光燈的光源。
鏡檢時身體要正對實習臺,采取端正的姿態,兩眼自然張開,左眼觀察標本,右眼觀察記錄及繪圖,同時左手調節焦距,使物象清晰并移動標本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時載物臺不可傾斜,因為當在五套載物臺傾斜時,液體或油易流出,既損壞了標本,又污染載物臺,也影響檢查結果。
鏡檢時應將標本按一定方向移動視野,直至整個標本觀察完畢,以便不漏檢,不重復。
顯微鏡的重光為對光,接物鏡的轉換及光線的調節。觀察寄生蟲標本時,光線調節甚為重要。因為所觀察的標本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉換較多,故須隨著鏡檢時對不同標本和要求,需要隨時調節焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下,染色標本光線宜強,無色或未染色標本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強。
1. 對光:
(1)將低倍鏡轉至鏡筒下方與鏡筒成一直線。
(2)撥動反光鏡,調節至視野亮無陰影。反光鏡有平、凹兩面,光源強時用平面,較暗時用凹面,需要強光時,將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時,將聚光器降低,或光圈適當縮小。
(3)將待觀察的標本置載物臺上,轉動粗調節器使鏡筒下降至接物鏡接近標本。于轉動粗調節器的同時,須俯身在鏡旁仔細觀察接物鏡與標本之間的距離。
(4)左眼于接目鏡觀察,同時左手轉動粗調節,使鏡筒徐徐上升以調節焦距,使視野內的物象看到上時即停,再調微調節器,至標本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調節:
顯微鏡一般具有三個接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉換盤孔中。觀察標本時,先使用低倍接物鏡,此時,視野較大,標本較易查出,但放大倍數較小(一般放大100倍),較小的物體不易觀察其結構。高倍接物鏡放大的倍數較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結構。
寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。組織細胞內的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準確鑒定所見的物體或其內部構造時,則轉高倍鏡觀察。使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進行鏡檢觀察。
3. 低倍、高倍、油鏡頭的識別:
(1)標明放大倍數10×,40×,100×,或10/0.25,40/0.65,100/1.25。
(2)低倍鏡短,高倍鏡較長,油鏡長。
(3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡大,高倍鏡較大,油鏡小。
(4)油鏡頭上常刻有黑色環圈,或“油”字。
4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法:
(1)光線對好后,移動推進器尋找需要觀察的標本。
(2)如標本的體積較大,不能清楚查見其構造因而不能確認時,則將標本移至視野中央,再旋轉高倍接物鏡于鏡筒下方。
(3)旋轉微調節器至物象清晰為止。
(4)調節聚光器及光圈,使視野內的物象達到清晰的程度。
5. 油鏡的使用方法:
(1)原理:使用油鏡觀察時,需加香柏油,因為油鏡需要進入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔小,這樣進入的光線就少,物體不易看清楚。同時又因自玻片透過的光線,由于介質(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質如香柏油,加于標本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚。
(2)油鏡的使用:
a.將光線調至程度(聚光器提高,光圈全部開放)。
b.轉動粗調節器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要涂開)于接物鏡正下方標本上。
c.轉動接物鏡轉換盤,使油鏡頭于鏡筒下方。
d.俯身鏡旁側面在肉眼的觀察下,轉動粗調節器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內,輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉動粗調節器,使油鏡頭徐徐上升至見到標本的物象為止。
f.轉動微調節器,使視野物象達到清晰的程度。
g.左手徐徐移動推進器,并轉動微調節器以觀察標本。
h.標本觀察完畢后,轉動粗調節器將鏡筒升起,取下標本玻片。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。
6. 注意事項:
(1)使用顯微鏡之前,應熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應掌握識別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲學實習中所觀察的標本,大多數為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調節。
(3)新鮮標本觀察時,須加蓋玻片,以免標本因蒸發而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時可使標本表面勻平,光線得以集中,有利于觀察。
二、 顯微鏡的保養
圖3 加用蓋玻片后,標本表面勻平,光線得以集中,便于檢查示意圖
1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時,右手緊握鏡臂,左手穩托鏡座,輕輕取出。不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實習臺上或裝 入木箱內。
2.顯微鏡放到實習臺上時,先放鏡座的一端,再將鏡座全部放穩,切不可使鏡座全面同時與臺面接觸,這樣震動過大,透鏡和微調節器的裝置易損壞。
3.顯微鏡須經常保持清潔,勿使油污和灰塵附著。如透鏡部分不潔時,用擦鏡紙輕擦,如有油污,先將擦鏡紙蘸少許二甲苯拭去。
4.顯微鏡不能在陽光下暴曬和使用。
5.接目鏡和接物鏡不要隨便抽出和卸下必須抽取接目鏡時,須將鏡筒上口凈用布遮蓋,避免灰塵落入鏡筒內。更換接物鏡時,卸下后應倒置在清潔的臺面下,并隨即裝入木箱的置放接物鏡的管內。
6.顯微鏡用完后,取下標本片,經聚光器降下,再將物鏡轉成“八”字形,轉動粗調節器使鏡筒下降,以免接物鏡與聚光器相碰。
7.顯微鏡應放在干燥的地方,以防生霉。